肿瘤的生长和转移依赖一个合适的微环境，进行癌细胞的原位注射可以获得更高的致瘤率和更好的转移环境，简单的理解就是，将癌细胞作为种子种植于肥沃的土壤里，这个种子将会更好、更快的发芽生长。
此次我做前列腺癌的的原位模型，从一开始就走了不少弯路，所以想用没有科学美感的分享文章分享出来。
首先依据自己实验目的，选择动物要合适的年龄、性别、品系，而我们选择的裸鼠因为天生的免疫缺陷，成瘤的可能性更高一些，这方面你通过文献查找就能确定，不过不同动物公司的动物品质差别不一，需要提前咨询，好好筛选。
选择完动物后，一定要做预实验或者练手让自己熟悉实验手术操作，通过事先查找资料，确定合适的造模位置，就我这次实验来说，寻找前列腺的位置花了不少时间，最主要的问题还是自己不认识，等完全确定后，一切就都变的清晰明了起来。
前列腺位置示意图
一开始，使用大鼠和昆明鼠做了预实验，怎么也找不到前列腺的位置，白白牺牲了几只鼠，后面直接买了裸鼠来做预实验，依然碰壁。。。。。最后请教老师，查找资料终于定位。
预实验使用台盼蓝，熟悉注射操作，显示前列腺位置
动物麻醉之后，体温下降很快，如果操作时间过长，动物很容易就死亡，所以涉及麻醉的动物实验，一定要注意动物的保温，这次气体麻醉，我选择在鼠下放置了一个小号的爬宠加热垫（谁说养爬的都是变态了，这不用上了吗？），做完实验的鼠暂放的笼子底部也有个大号的加热垫，很好的解决了动物的失温问题，减少了不必要的死亡。
大概的实验操作如下：
首先必须确保整个手术在超净台完成，需提前对超净台进行紫外消毒，并且对手术所需所有器具进行消毒灭菌，确保整个过程的无菌环境。
所有器械都需使用之前紫外照射灭菌
细胞：对数生长期细胞用0.25%胰酶+0.02%EDTA消化，PBS溶液洗涤离心后重悬制备2.0X10^7/ml（1.0-2.0X10^5细胞）细胞悬液，移入无菌冻存管带至动物实验中心备用。
裸鼠用异氟烷气体麻醉后固定（最先使用了10%水合氯醛，但是鼠很容易死，后采用气体麻醉，无一死亡），碘伏消毒皮肤后，下腹正中剪开表皮、分离包皮腺（裸鼠一般透过表皮就能看到包皮腺，很容易定位，膀胱就在两包皮腺中间皮下，通过膀胱的位置去定位精囊腺的位置）、肌肉层、牵开膀胱和精囊腺（精囊腺很容易破裂，注意使用钝口的镊子），棉签辅助充分暴露前列腺，用镊子轻轻拉起精囊腺，顺着膀胱的方向，一次性1ml胰岛素注射器29g针头向前列腺前叶包膜注射上述细胞悬液25—50（最多）微升，包膜向上鼓起，脱离腺体表面，注射后轻轻抽取针头，并用湿棉签轻压几秒防止泄露，恢复脏器解剖位置，7-0可吸收缝合线缝间断缝合肌层和表皮，第二天一定要去查看，防止脱线。
选择前列腺前叶主注射是因有老师告诉我，注射方便，腹部位置有血管，最好避开
因为打入的肿瘤细胞含有荧光素酶基因，往鼠体内打入荧光素酶底物，就能在小动物活体成像系统中看到肿瘤细胞位置，扩散、增值、转移都能看的一清二楚。
我选择的是荧光素酶钾底物，拍照前10分钟，按照10ul/g体重浓度，腹腔注射15mg/ml荧光素酶钾工作液，一般购买的是固体粉末，使用前用无钙镁pbs或者生理盐水稀释。
注射八天之后的影像，两边两只注射效果不错
拍完照取出的精囊腺和前列腺
从实验开始，就受到了不少人的帮助，就不一一点名感谢啦，在此谢谢各位老师的帮助，让我顺利开展实验
REF：
[1]刘旭东,曾津,杨林,徐珊,张涛,谢宏俊,马振坤,王新阳,贺大林.一种可用活体荧光成像技术检测的前列腺原位肿瘤模型的建立[J].现代泌尿外科杂志,,17(03):-.
[2]AHarmelinet,Biopsyofthemouseprostate